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trazol伴侣(r1071)

价格: 702.00

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r1071(100次)

trazol伴侣

产品说明

trazol是经典的总rna提取试剂,也是各家生物公司、实验人员提取rna最常用的试剂。东盛生物在使用trazol提取的传统方法上,加以改进,推出trazol伴侣,简化操作步骤,可在更短时间内获得纯度更高的rna。本产品可搭配各公司trizol及其他基于酸酚/异硫氰酸胍提取原理的rna提取产品,包括trizoltrizol lstri reagent等,从动物组织、植物组织、各种微生物、培养细胞等中提取总rna。所得总rna纯度高,基本不含蛋白质及基因组dna。提取的rna可以直接用于northern杂交、斑点杂交、mrna纯化、体外翻译、rna分解酶的保护分析、rt-pcr、构建cdna文库等各种分子生物学实验。

 

产品组成

货号

r1071100次)

溶液rpi

36 ml

溶液rw

24 ml

depc处理水

20 ml

rnase-free 纯化柱

100

rnase-free 收集管

100

说明书

1

需要自备无水乙醇溶液

 

保存条件

室温保存。

 

注意事项

●  严防操作环境、使用的容器、耗材和试剂的rnase污染。操作过程中勤换手套。

●  第一次使用前应在溶液rpi和溶液rw中加入无水乙醇,加入量为溶液rpi:无水乙醇=32,溶液rw:无水乙醇=14,即每36 ml溶液rpi需要加入24 ml无水乙醇,每24 ml溶液rw需要加入96 ml无水乙醇。

●  使用本产品提取的rna一般不含有dna污染。在极少数情况下(与组织ph值等相关),如果有dna污染而又必须去除,则可以用rnase-freednase处理样品。

●  请严格遵照操作步骤操作。

●  不同起始材料用量会影响rna的产率。

 

操作步骤

第一次使用前应在溶液rpi、溶液rw中加入无水乙醇,加入量请参考瓶上标签。

trazolcat. #r1021/r1022的使用手册进行总rna提取到经氯仿处理得到上清液。

2  缓慢加入0.5倍体积无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀)。将得到溶液和沉淀一起转入纯化柱(纯化柱收集管)中,4℃ 12,000 rpm离心30 s4℃ 12,000 rpm离心30 s,弃掉收集管中的废液。(若一次不能将全部溶液和混合物加入纯化柱中,可以分两次离心。)

3  向纯化柱中加入500 μl溶液rpi(使用前请先检查是否已按3:2加入无水乙醇,即含40%乙醇),4℃ 12,000 rpm离心30 s,弃废液。

4  向纯化柱中加入500 μl溶液rw(使用前请先检查是否已按1:4加入无水乙醇,即含80%乙醇),室温静置2 min4℃ 12,000 rpm离心30 s,弃废液。

5  重复上步操作,去除残余液体。

6  将纯化柱放回2ml收集管中,4℃ 12,000 rpm空离2 min,去除残余液体。

注意:此步骤目的是将纯化柱中残余的漂洗液去除,离心后将纯化柱在室温放置片刻,或置于超净工作台上通风片刻,以充分晾干。如果有漂洗液残留,可能会影响后续的rt等实验操作。

7  将纯化柱转入一个新的1.5 ml离心管中,加30–100 μl rnase-free ddh2o,室温放置2 min4℃ 12,000 rpm离心2 min

洗脱缓冲液体积不应少于30 μl,体积过小影响回收效率。rna应保存在-70℃,以防降解。

注意:如果想提高rna得率,可重复上步操作一次,合并两次得到的溶液。


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